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Klassifikation
Zusammenfassung
  • Ziel war es, das intrazelluläre Verteilungsmuster von HSV1-Proteinen in intakten, unfixierten Säugerzellen zu analysieren und Rückschlüsse auf den intrazellulären Transport von Nachkommenviren und subviraler Bestandteile zu erzielen. Der Transfer der Sequenzen des Kapsidproteins UL35, der Tegumentproteine US9 und US11 sowie der Hüllglykoproteine gE und gL erfolgte mit dem Vektor pBacMam2gDproEGFP, der die Expression viraler Fusionsproteine mit EGFP als Marker erlaubt. Weitere Fusionsproteine wurden mit den Autofluoreszenzproteinen EYFP, ECFP und DsRed konstruiert. Nach Expression der Fusionsproteine in Säugerzellen zeigte die fluoreszenzmikroskopische Untersuchung typische intrazelluläre Verteilungsmuster, aus denen Rückschlüsse auf ihre Funktion im Replikationszyklus gezogen werden konnten. Durch Koexpression von zwei oder drei verschiedenfarbig autofluoreszierenden Virusproteinen in einer Zelle gelang es erstmals, simultan die intrazelluläre Verteilung von viralen Hüll-, Tegument- und Kapsidbestandteilen in intakten Zellen zu beobachten.
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