Titelaufnahme
Titelaufnahme
- TitelUntersuchungen kombinierter DNA-Protein-Transduktion zur Optimierung nicht-viralen Gentransfers
- Verfasser
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- Erschienen
- SpracheDeutsch
- DokumenttypDissertation
- Schlagwörter (DE)
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Zusammenfassung
Zur Etablierung eines rekombinanten phiC31-TAT-Systems für den nicht-viralen Gentransfer wurden verschiedene phiC31-Integrase-Konstrukte in E. coli BL21 Bakterien rekombinant exprimiert, chromatographisch aufgereinigt und sowohl im Reagenzglas als auch in renalen, alveolären und T-Zelllinien auf Funktionalität getestet. Zur Transduktion dieser Integrase-Plasmid-Komplexe in unterschiedliche Zelltypen wurden verschiedene Transduktionsmethoden verwendet. Stellvertretend für Lunge, Niere und Lymphozyten wurden A549-, 293- und Jurkat-T-Zellen mit Komplexen aus rekombinanter Integrase und einem Luziferase-attB-Plasmid behandelt und über einen Zeitraum von einem Monat auf Luziferaseexpression getestet. Der kombinierte phiC31-Integraseprotein-Plasmid-Transfer ist eine vielversprechende Anwendung für den nicht-viralen Gentransfer, was insbesondere durch die Vermittlung stabiler Langzeittransgenexpression in verschiedenen Zelltypen gezeigt werden konnte.
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