Zürner, Doris Julia; Matei, Doris Julia: Entwicklung einer Methode zur gaschromatographischmassenspektrometrischen Bestimmung von 3-Hydroxyfettsäuren aus bakteriellem Endotoxin. 2009
Inhalt
- Diese Arbeit ist meinem Ehemann Helmut Zürner gewidmet.
- Inhaltsverzeichnis
- 1. Einleitung
- 2. Material und Methoden
- 2.1 Chemikalien
- 2.2 Geräte
- 2.3 Stammlösungen
- 2.4 Derivatisierungsverfahren
- 2.4.1 Standardlösungen für die Derivatisierung
- 2.4.2 Derivatisierung im „Eintopfverfahren“ bei unterschiedlicher Temperatur
- 2.4.3 Stufenweise Derivatisierung mit Zugabe von Essigsäure
- 2.4.4 Stufenweise Derivatisierung bei unterschiedlicher Temperatur
- 2.4.5 Standard-Derivatisierungsverfahren
- 2.5 Gaschromatographische Trennung und Massenspektrometrie
- 2.5.1 Gaschromatographische Trennung mit Cool-on-Column-Injektion
- 2.5.2 Single-Ion-Modus und Total-Ion-Modus
- 2.6 Kalibration
- 2.7 Hydrolyse des Lipopolysaccharids von E. coli
- 2.8 Qualitätskriterien
- 3. Ergebnisse
- 3.1 Massenspektren der Derivate der 10:0, 12:0, 14:0, 15:0, 16:0 3-OH Fettsäuren
- 3.2 Gaschromatographische Trennung
- 3.3 Bestimmung der 3-OH Fettsäuren aus Lipopolysacchariden
- 3.4. Kalibrationsfunktionen der 3-Hydroxyfettsäuren
- 3.5. Standardabweichungen
- 3.6 Nachweis- und Bestimmungsgrenzen
- 4. Diskussion
- 4.1 Die Zellwandstruktur gram-negativer Bakterien
- 4.2 Wirkung von Endotoxinen auf den menschlichen Organismus
- 4.2.1 Medizinische Relevanz von Endotoxin
- 4.2.2 Pathophysiologie der durch Endotoxine hervorgerufenen Entzündungsreaktion
- 4.3 Endotoxinvorkommen in privaten und öffentlichen Umgebungen
- 4.4 Arbeitsmedizinische Prävention
- 4.4.1 Rechtliche Regelung des Arbeits- und Gesundheitsschutzes
- 4.4.2 Einstufung von Gefahrstoffen und biologischen Arbeitsstoffen
- 4.4.3 Grenzwerte
- 4.4.3.1 Arbeitsplatzgrenzwerte in der Luft am Arbeitsplatz
- 4.4.3.2 Biologische Grenzwerte
- 4.4.4 Richtwerte für Endotoxinbelastungen in der Luft am Arbeitsplatz
- 4.5 Nachweis von Endotoxinen
- 4.5.1 Limulus-Amöbozyten-Lysat (LAL)-Test
- 4.5.2 Chemisch-analytische Nachweisverfahren zur Bestimmung von Endotoxin
- 4.5.2.1 Grundlagen der Gaschromatographie
- 4.5.2.2 Grundlagen der Massenspektrometrie
- 4.6. Alternativmethoden zur quantitativen Bestimmung von Endotoxin
- 4.7 Bewertung der neuen Methode zur Quantifizierung von bakteriellem LPS mit Hilfe der GC/MS
- 4.8. Beantwortung der eingangs gestellten Fragen
- 5. Zusammenfassung
- 6. Literaturverzeichnis
- 7. Lebenslauf
- 8. Danksagung