Klamp, Tobias: Ein schnelles Bead-basiertes und bildgebendes Verfahren zur Quantifizierung von Nukleinsäuren für die Integration in Lab-on-a-Chip-basierten Point-of-Care [...]. 2013
Inhalt
- Zusammenfassung
- Summary
- Abkürzungsverzeichnis
- 1 Einleitung
- 1.1 Diagnostik von CA-LRTI Pathogenen, Stand der Technik
- 1.2 Point-Of-Care-Testing (POCT)
- 1.3 Detektion und Identifikation von Nukleinsäuren
- 1.4 Zielsetzung
- 2 Theoretische Grundlagen
- 3 Material und Methoden
- 3.1 Ensemble Spektroskopie
- 3.2 Fluoreszenz Mikroskopie
- 3.3 Datenanalyse
- 3.4 Benutzte Fragmente
- 3.5 Probenzubereitung
- 3.6 Bestimmung des SCRs bei Zweifarbendetektion (Multiplexing)
- 3.7 Berechnung der Verluste durch Austausch des Objektives
- 4 Ergebnisse und Diskussion
- 4.1 Das Bead-basierte Quantifizierungsverfahren
- 4.1.1 Datenverarbeitung
- 4.1.2 Möglichkeiten des Nachweisverfahrens
- 4.1.3 Limitierungen des Nachweisverfahrens
- 4.2 Der Hybridisierungsprozess
- 4.2.1 Optimierung der Beschichtungsdichte
- 4.2.2 Variation der Länge der capDNA Fragmente
- 4.2.3 Einfluss der Binderegionen von detDNA und capDNA
- 4.2.4 Erhöhung der Affinität durch Modifikation der capDNA
- 4.2.5 Einzelsträngige und doppelsträngige Ziel-Fragmente
- 4.3 Der Markierungsprozess (Das Reportersystem)
- 4.4 Implementierung der Anforderungen für die Integration des Verfahrens in LOC-basierten POCT Systemen
- 4.4.1 Die integrierte LOC-Prozedur
- 4.4.2 Prämissen für POCT-basierte Anwendungen
- 4.4.3 Zusätzliche Optimierungen
- 4.4.4 Bewertung der elementaren Parameter
- 4.4.5 Detektionslimit
- 4.5 Multiplexing
- 5 Fazit und Ausblick
- Literaturverzeichnis
- Publikationen
- Danksagung