Greif, Dominik: Einzelzell-Proteinanalytik. 2013
Inhalt
- 1 Einleitung und Motivation
- 2 Grundlagen/Theoretischer Hintergrund
- 2.1 Grundlagen und Historie der Mikrofluidik
- 2.2 Mikrochip-Elektrophorese
- 2.3 Mikrochip-Zellkultivierung und Langzeitbeobachtung
- 2.4 Fluoreszenzdetektion von Proteinen
- 2.5 Zellen
- 3 Experimenteller Aufbau
- 4 Material und Methoden
- 4.1 Verwendete Chemikalien
- 4.2 Zellkultivierung
- 4.2.1 Sf9-Zellkultur
- 4.2.2 Anzucht von Bakterien zur Untersuchung der Oberflächenstrukturen
- 4.2.3 Anzucht von Bakterien für das TLFI zur Bestimmung von zeit- und ortsaufgelöster Proteindynamik
- 4.3 Zellpräparation (für Experimente)
- 4.3.1 Waschen von Sf9 Zellen für Einzelzellexperimente
- 4.3.2 CFDA-SE Markierung aller Proteine in Sf9 Zellen
- 4.3.3 Präparation von Bakterien zur Untersuchung der Oberflächenstrukturen
- 4.4 Hochauflösende Mikroskopie
- 4.5 Softlithographie
- 4.6 DRIESO
- 5 Ergebnisse und Diskussion
- 5.1 Erste Einzelzellelektropherogramme in PDMS-Chips
- 5.2 pH-Abhängigkeit
- 5.3 PQW-Chips
- 5.4 QG-Chips
- 5.5 Nachweisgrenze
- 5.6 Proteintrennung
- 5.7 Parallele Detektion
- 5.8 Oberflächenstrukturen von Bakterien
- 5.9 TLFI zur Bestimmung von Zeit- und Ortsaufgelöster Proteindynamik
- 6 Zusammenfassung und Ausblick
- 7 Literaturverzeichnis
- 8 Glossar
- 9 Danksagung
- 10 Anhang
