Gunkel, Manuel: Lokalisationsmikroskopie mit mehreren Farben und ihre Anwendung in biologischen Präparaten. 2011
Inhalt
- Einleitung
- Grundlagen
- Die optische Abbildung
- Geometrische Optik
- Wellenoptik
- Gaußsche Strahlenoptik
- Fourieroptik
- Punktverteilungsfunktion (PSF) und optische Transferfunktion (OTF)
- Auflösung
- Fluoreszenz
- Digitale Bilderfassung
- Lokalisationsmikroskopie
- Theoretisch erreichbare Genauigkeit bei der Lokalisation einzelner Molekülsignale
- Der Levenberg-Marquardt-Algorithmus zur Minimierung der quadratischen Abweichung
- Methoden zur Lokalisation von Einzelmolekülsignalen
- Die in dieser Arbeit verwendeten Mikroskope
- Algorithmen zur Datenauswertung
- Auswertung der Daten
- Visualisierungen
- Weitere Auswertung der Lokalisationsdaten
- Bestimmung der axialen Position der Lokalisationsdaten innerhalb einer Zelle / eines Zellkerns
- Selektion interessanter Bereiche im Lokalisationsbild
- Verfolgung dünner Strukturen im Lokalisationsbild
- Clusteranalyse
- Bestimmung der axialen und lateralen Verschiebung bei sequentiellen Zweifarben-Lokalisationsmessungen
- Zweifarbennachbarlabel
- Simulationen zur Clusteranalyse
- Ergebnisse
- Das Tabakmosaikvirus (TMV)
- Lokalisationsmikroskopie von FISH-markierten Präparaten
- Untersuchung von Proteinverteilungen im menschlichen Kinetochor
- Centromerprotein A (CENP-A)
- Centromerprotein B (CENP-B)
- Centromerprotein C (CENP-C)
- Untersuchung der relativen Verteilung der Centromerproteine
- Die Verteilung von Histon-Protein H2A und DNA-Remodeler SNF2h
- Die Verteilung von RNA-Polymerase II und Histonprotein H2B
- Diskussion und Ausblick